ГЕН pssA КОДИРУЕТ UDP-ГЛЮКОЗА : ПОЛИПРЕНИЛФОСФАТ−ГЛЮКОЗИЛФОСФОТРАНСФЕРАЗУ, ИНИЦИИРУЮЩУЮ ПРОЦЕСС БИОСИНТЕЗА ЭКЗОПОЛИСАХАРИДА У Rhizobium leguminosarum

© 2007 г. В. Н. Ксензенко* ^#, Т. В. Ивашина**, З. А. Дубейковская**, С. Г. Иванов**, М. Б. Наназашвили***, Т. Н. Дружинина****, Н. А. Калинчук****, В. Н. Шибаев****

^#Тел.: (4967) 73-39-53; факс: (495) 632-78-71; e-mail: [email protected]

*Институт белка РАН, 142290, Пущино, ул. Институтская, 4;
**Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина РАН, Пущино;
***Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино;
****Институт органической химии им. Н.Д. Зелинского РАН, Москва

Поступила в редакцию 21.03.2006 г. Принята к печати 25.04.2006 г.

Симбиотические азотфиксирующие бактерии Rhizobium leguminosarum bv. viciae VF39 секретируют кислый гетерополисахарид, биосинтез которого включает стадию образования полипренилдифосфатоктасахарида, углеводный фрагмент которого соответствует повторяющемуся звену полимера. Анализ аминокислотной последовательности продукта идентифицированного нами ранее гена pssA показал его гомологию с последовательностями бактериальных полиизопренилфосфат-гексозо-1-фосфат-трансфераз, катализирующих образование фосфодиэфирной связи между полипренилфосфатом и гексозо-1-фосфатами, донорами которых являются нуклеотидсахара. Методом иммуноблотинга показано, что в клетках ризобий синтезируется белок с молекулярной массой 25 кДа, что предполагает трансляцию открытой рамки считывания гена pssA со второго инициирующего кодона с последующей модификацией белка. Показано, что PssA является интегральным мембранным белком, участвующим в переносе глюкозо-1-фосфата с UDP-глюкозы на полипренилфосфат с образованием полипренилдифосфатглюкозы. На основании этих данных сделан вывод о том, что ген pssA кодирует UDP-глюкоза : полипренилфосфатглюкозилфосфотрансферазу.

Ключевые слова: экзополисахариды; гликозилтрансферазы; мембранные белки; полипренилдифосфатсахара; Rhizobium leguminosarum.

Биоорг. химия 2007, 33(1): 160-166