РЕКОМБИНАНТНОЕ ПОЛНОРАЗМЕРНОЕ АНТИТЕЛО ЧЕЛОВЕКА ПРОТИВ ВИРУСА ЭБОЛА

© 2007 г. Л. Н. Шингарова*^#, Н. В. Тикунова**, Т. Э. Юн**, А. А. Чепурнов**, Т. К. Алиев*, Т. А. Батанова**, Е. Ф. Болдырева*, О. В. Некрасова*, В. А. Топорова*, А. А. Панина*, М. П. Кирпичников*, Л. С. Сандахчиев**

^#Тел.: (495) 330-69-83; e-mail: [email protected]

*Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 ГСП, Москва, В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10;
**ФГУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор», Новосибирская обл., пос. Кольцово

Поступила в редакцию 31.08.2006 г. Принята к печати 06.10.2006 г.

Для конструирования полноразмерного антитела человека против вируса Эбола гены, кодирующие константные домены тяжелой и легкой цепей иммуноглобулина человека, были объединены с соответствующими фрагментами ДНК, кодирующими вариабельные домены одноцепочечного антитела 4D1, специфичного к вирусу Эбола, отобранного из комбинаторной фаговой библиотеки одноцепочечных антител человека. Были созданы две экспрессионные плазмиды pCH1 и pCL1, содержащие искусственные гены, кодирующие тяжелую и легкую цепи иммуноглобулина человека соответственно. Их котрансфекция в клеточную линию эмбриональных почек человека HEK293Т обеспечила продукцию полноразмерного рекомбинантного антитела человека. Константа аффинности этого антитела, измеренная с помощью твердофазного ИФА, составила 7.7·10⁷ ± 1.5·10⁷ М^-1. Полученное антитело, как и исходное одноцепочечное антитело 4D1, связывало нуклеопротеин NP вируса Эбола, но не взаимодействовало с белками вируса Марбург.

Ключевые слова: полноразмерные человеческие антитела; фаговый дисплей; вирус Эбола.

Биоорг. химия 2007, 33(6): 598-605