ВЫДЕЛЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА РЕКОМБИНАНТНОГО OmpF-ПОДОБНОГО ПОРИНА ИЗ НАРУЖНОЙ МЕМБРАНЫ Yersinia pseudotuberculosis

© 2008 г. В. А. Хоменко, О. Ю. Портнягина^#, О. Д. Новикова, М. П. Исаева, Н. Ю. Ким, Г. Н. Лихацкая, О. П. Вострикова, Т. Ф. Соловьева

^#Тел.: (4232) 310719; факс: (4232) 314050; e-mail: [email protected]

Тихоокеанский институт биоорганической химии ДВО РАН, 690022, Владивосток, просп. 100-летия Владивостока, 159

Поступила в редакцию 02.05.2007 г. Принята к печати 01.10.2007 г.

Кодирующая последовательность порообразующего OmpF-подобного белка из наружной мембраны Yersinia pseudotuberculosis была клонирована и экспрессирована в клетках Escherichia coli. Подобраны условия выделения и рефолдинга рекомбинантного мономера и тримера порина. С помощью собственной белковой флуоресценции и спектроскопии КД охарактеризована их пространственная структура. Показано, что рекомбинантные порины по содержанию элементов вторичной структуры подобны изолированным поринам, но имеют существенно менее компактную третичную структуру. Получены данные о том, что рекомбинантные белки проявляют порообразующую активность, подобную активности нативных поринов Y. pseudotuberculosis.

Ключевые слова: Yersinia pseudotuberculosis, наружная мембрана, рекомбинантный порин, рефолдинг.

Биоорг.химия 2008, 34(2): 177-184