ХАРАКТЕРИСТИКА СВЯЗЫВАНИЯ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ С С-ДОМЕНОМ АНГИОТЕНЗИНПРЕВРАЩАЮЩЕГО ФЕРМЕНТА ЧЕЛОВЕКА

^#Тел.: (495) 939-34-17; факс: (495) 939-54-17; e-mail: [email protected]

*Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, химический факультет, 119992, Москва, Воробьевы горы;
**Факультет анестезиологии, Иллинойский университет, Чикаго, США;
***ФГУ НИИ урологии Росмедтехнологий, Москва

Поступила в редакцию 03.07.2007 г. Принята к печати 16.11.2007 г.

Изучено связывание панели из восьми моноклональных антител (mAb) к С-домену ангиотензинпревращающего фермента (ACE) с тестикулярным ACE (tACE) человека (соответствующим С-домену соматического фермента) и выявлено mAb 4Е3, ингибирующее активность фермента. Для двух mAb, 1В8 и 2Н9, определены константы диссоциации их комплексов с tACE, которые составили соответственно 2.3 ± 0.4 и 2.5 ± 0.4 нМ для рекомбинантного tACE и 4.7 ± 0.5 и 1.6 ± 0.3 нМ для tACE из сперматозоидов. Получены и проанализированы данные по конкуренции mAb за связывание с tACE. В результате восемь mAb были разделены на три группы – 1) 1Е10, 2В11, 2Н9, 3F11 и 4Е3; 2) 1В8 и 3F10; и 3) 1В3, – эпитопы связывания которых не перекрываются между собой. Предложена диаграмма, демонстрирующая конкурентность связывания mAb с tACE. Проведено сравнение связывания mAb с ACE человека и шимпанзе, в результате выявлены два аминокислотных остатка, Lys677 и Pro730, отвечающие за связывание трех антител – mAb 1Е10, 1В8 и 3F10. Мутация остатка Asp616, расположенного рядом с Lys677, на Leu позволила установить, что в эпитоп связывания mAb 1Е10 входят Asp616 и Lys677, в то время как Pro730 входит в эпитоп связывания mAb 1В8 и 3F10.

Ключевые слова: ангиотензинпревращающий фермент; С-домен; моноклональные антитела.

Биоорг.химия 2008, 34(3): 358-364