МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКИЙ ПОДХОД К ПЕРВИЧНОМУ СКРИНИНГУ КОЛЛАГЕНОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ

© 2008 г. Ю. В. Сунгуров^#, Н. Л. Еремеев, А. Т. Лебедев, О. А. Малошицкая, Г. Н. Руденская, С. А. Семенова

^#Тел.: (495) 939-34-17; факс: (495) 939-54-17; e-mail: [email protected]

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, химический факультет, 119992, Москва, Воробьевы горы, д. 1, стр. 3

Поступила в редакцию 02.07.2007 г. Принята к печати 19.07.2007 г.

Проведен сравнительный анализ MALDI-масс-спектров низкомолекулярных продуктов, полученных в результате гидролиза нативного коллагена I коллагеназами разных классов (бактериальная металлоколлагеназа из Clostridium histolyticum, сериновая коллагеназа из коммерческого препарата «Морикраза», цистеиновая коллагеназа из Serratia proteomaculans; цистеиновые коллагеназы из личинок жуков Dermestes frischi и Dermestes maculatus). Несмотря на наличие некоторого количества общих для всех коллагеназ пиков ионов, масс-спектр каждого гидролизата содержит уникальный набор пиков («фингерпринт»), характерный для данного фермента. Особенно четко это проявляется в отношении пиков мажорных продуктов с относительными интенсивностями более 50%. В то же время для ферментов одного класса (цистеиновых коллагеназ) в масс-спектрах присутствуют пики одинаковых мажорных продуктов. Полученные результаты показывают потенциальную возможность применения MALDI для первичного скрининга коллагеназ по «фингерпринтам» продуктов гидролиза коллагена.

Ключевые слова: коллаген, коллагеназы, матрично активированная лазерная десорбция-ионизация, масс-спектрометрия.

Биоорг.химия 2008, 34(3): 392-398