БИОКАТАЛИТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ТЕРМОЛИЗИНА, ИММОБИЛИЗОВАННОГО НА КРИОГЕЛЕ ПОЛИВИНИЛОВОГО СПИРТА
© 2008 г. А. В. Беляева*, Ю. А. Смирнова**, Е. Н. Лысогорская***, Е. С. Оксенойт***, А. В. Тимофеева****, В. И. Лозинский*, И. Ю. Филиппова***#
#Тел.: (495) 939-55-29; факс: (495) 932-88-46; e-mail: [email protected]
*Институт элементоорганических соединений им. А.Н. Несмеянова РАН, Москва; **Факультет биоинженерии и биоинформатики, ***химический факультет, ****НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского, Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, 119992, Москва, В-234, Воробьевы горы
Поступила в редакцию 14.06.2007 г. Принята к печати 22.10.2007 г.
Иммобилизацией термолизина на гранулированном криогеле поливинилового спирта получены препараты с различным содержанием фермента. Исследована их активность и стабильность в водной среде и в смесях полярных органических растворителей различного состава. Изучены каталитические свойства препаратов в реакциях образования пептидных связей и определено оптимальное количество биокатализатора, концентрация исходных реагентов и соотношения органических растворителей и воды, необходимые для эффективного проведения ферментативного пептидного синтеза, катализируемого иммобилизованным термолизином. Получен ряд пептидов общей формулы Z-Ala-Ala-Xaa-pNA, где Xaa = Leu, Ile, Phe, Val, Ala, и показано, что в органической среде иммобилизованный фермент сохраняет субстратную специфичность.
Ключевые слова: иммобилизованный термолизин; криогель поливинилового спирта; ферментативный пептидный синтез в водно-органических смесях.