ПОЛУЧЕНИЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К ПРИОННОМУ БЕЛКУ И ИХ ХАРАКТЕРИСТИКА

© 2008 г. М. Б. Обозная*^#, Н. М. Владимирова*, М. А. Титова*, Т. Д. Волкова*, Д. О. Короев*, А. А. Рябоконь**, А. А. Егоров**, С. С. Рыбаков**, О. М. Вольпина*

^#Тел.: (495) 336-57-77; факс: (495) 335-71-03; e-mail: [email protected]

*Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 ГСП, Москва В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10;
**ФГУ "Федеральный центр охраны здоровья животных Россельхознадзора" (ФГУ "ВНИИЗЖ"), Владимир

Поступила в редакцию 31.08.2007 г. Принята к печати 28.11.2007 г.

Антитела к прионному белку (PrP), особенно моноклональные, являются необходимым инструментом диагностики и исследования прионных болезней, а также потенциальным средством их иммунотерапии. Для получения моноклональных антител проводили иммунизацию мышей линии BALB/с рекомбинантным бычьим прионным белком. Были получены три стабильные гибридомы, продуцирующие антитела класса IgM. Эти антитела связывались с PrP в твердофазном иммуноферментном анализе и в иммуноблоте. Эпитопное картирование, проведенное с помощью синтетических пептидов, показало, что одному антителу соответствует эпитоп, локализованный на участке 25–36 PrP, а двум другим – на участке 222–229. Аффинно-очищенные антитела к фрагменту 222–229 с высокой специфичностью распознавали скопления патогенного приона в ткани мозга больных губчатой энцефалопатией коров. Таким образом, у нетрансгенных мышей были получены специфичные к PrP моноклональные антитела, пригодные для применения в исследованиях и диагностике прионных болезней.

Ключевые слова: прионный белок; моноклональные антитела; эпитоп; картирование.

Биоорг.химия 2008, 34 (6): 754-763