МОЛЕКУЛЯРНОЕ КЛОНИРОВАНИЕ, ЭКСПРЕССИЯ И ХАРАКТЕРИСТИКА МИНИ-АНТИТЕЛ ЧЕЛОВЕКА ПРОТИВ ЭНТЕРОТОКСИНА C1 Staphylococcus aureus

© 2009 г. Н. А. Калинина*, Л. В. Самохвалова*^#, А. Б. Улитин**, Ю. В. Вертиев***, В. А. Несмеянов*

^#Тел.: (495) 330-66-83; e-mail: [email protected]

*Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 ГСП, Москва, В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10;
**Филиал Института биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Пущино Московской обл.;
***Государственное учреждение научно-исследовательский институт микробиологии и эпидемиологии им. акад. Н.Ф. Гамалеи РАМН, Москва

Поступила в редакцию 11.03.2008 г. Принята к печати 11.09.2008 г.

Описано клонирование, экспрессия и продукция специфических одноцепочечных антител (scFv) против рекомбинантного энтеротоксина С1 золотистого стафилококка. Из фаговой библиотеки мини-антител человека отбирали высокоаффинные scFv, а затем продуктами слияния их ДНК с геном trxA инфицировали клетки двойного мутанта E. coli trxA gor для продукции растворимых scFv в цитоплазме клеток. Проанализированные антитела имели высокую аффинность к энтеротоксину С1. Эксперименты по оценке перекрестного взаимодействия показали, что полученные мини-антитела реагировали также с SEA-, SEB-, SED-, SEE-, SEG- и SEI-типами энтеротоксина, но не реагировали с рицином, дифтерийным и холерным токсином, а также летальным и протективным факторами сибиреязвенного токсина. Данное свойство может быть использовано для скрининга энтеротоксинов стафилококка.

Ключевые слова: мини-антитела человека, фаговый дисплей scFv, аффинная селекция, энтеротоксин С1 золотистого стафилококка.

Биоорг.химия 2009, 35 (2): 192-201