ОПТИМИЗАЦИЯ ПРОМЫШЛЕННОГО ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО ПРЕДШЕСТВЕННИКА ИНСУЛИНА ЧЕЛОВЕКА
© 2009 г. В. Д. Гусарова*,**#, Д. А. Гусаров*,**, А. Ф. Миронов**, Д. И. Баирамашвили*, А. И. Мирошников*
#Тел.: (495) 429-87-40; e-mail: [email protected]
*Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 ГСП, Москва, В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10; **Московская государственная академия тонкой химической технологии им. М.В. Ломоносова, Москва
Поступила в редакцию 28.11.2008 г. Принята к печати 26.01.2009 г.
На аналитическом уровне подобраны условия солюбилизации рекомбинантного предшественника инсулина из телец включения в различных буферных системах в широком диапазоне рН в присутствии разных восстанавливающих (дитиотреитол, дитиоэритритол) и хаотропных (мочевина, гуанидингидрохлорид) агентов и последующей ренатурации с использованием окислительно-восстановительных пар (цистеин–цистин, окисленный глутатион–восстановленный глутатион и др.). Проведено масштабирование разработанной методики для производства активной субстанции генно-инженерного инсулина человека.
Ключевые слова: рекомбинантный белок, агрегация, ренатурация; тельца включения.
Биоорг.химия 2009, 35 (4): 510-518