НОВЫЕ СПОСОБЫ ГЕНЕРАЦИИ СИГНАЛА ФЛУОРЕСЦЕНЦИИ ПРИ АНАЛИЗЕ ОДНОНУКЛЕОТИДНЫХ ЗАМЕН С ПОМОЩЬЮ ХИМЕРНЫХ ГИБРИДИЗАЦИОННЫХ ЗОНДОВ В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕНИ

© 2009 г. Р. Р. Гарафутдинов*^#, Ю. М. Никоноров*, Д. А. Чемерис*, Б. Н. Постригань*, О. В. Чубукова*, Р. Ф. Талипов*^*, В. А. Вахитов*, А. В. Чемерис*

^#Тел./факс: (347) 235-60-88; e-mail: [email protected]

*Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН, 450054, Уфа, просп. Октября, 71;
**Башкирский государственный университет, Уфа

Поступила в редакцию 16.12.2008 г. Принята к печати 25.03.2009 г.

Предложены новые варианты генерации и усиления сигнала флуоресценции при анализе однонуклеотидных замен в режиме реального времени. Для генерации флуоресценции использованы меченые ДНК-РНК-ДНК-химерные олигонуклеотидные зонды, которые отжигаются на ДНК-мишени, образующейся в ходе аллель-специфического лигирования «С-зонда» и последующей изотермической амплификации по методу «катящегося кольца», и разрушаются в ходе реакций ферментативного и дезоксирибозимного расщепления.

Ключевые слова: однонуклеотидный полиморфизм; химерные гибридизационные зонды, дезоксирибозимы; технология циклического зонда; амплификация по методу «катящегося кольца».