ПОЛУЧЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К ДИФТЕРИЙНОМУ ТОКСИНУ

© 2009 г. Т. И. Валякина*^#, О. Е. Лахтина*, Р. Л. Комалева*, М. А. Симонова*, Л. В. Самохвалова*, Н. С. Шошина*, Н. А. Калинина*, А. Ю. Рубина**, М. А. Филиппова**, Ю. В. Вертиев***, Е. В. Гришин*

^#Тел.: (495) 335-3533; e-mail: [email protected]

*Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 ГСП, Москва, В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10;
**Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, Москва;
***Государственное учреждение научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. поч. акад. Н.Ф. Гамалеи РАМН, Москва

Поступила в редакцию 10.04.2009 г. Принята к печати 30.04.2009 г.

Получены моноклональные антитела к дифтерийному токсину, перекрестно не взаимодействующие с термолабильным токсином (LT) Escherichia coli, с рицином, холерным токсином, токсинами стафилококков SeA, SeB, SeE, SeI, SeG, с летальным фактором сибиреязвенного токсина и протективным антигеном сибиреязвенного токсина. Подобраны пары антител для количественного определения дифтерийного токсина в сандвич-варианте иммуноферментного анализа (ИФА). Предел обнаружения токсина достигает 0.7 нг/мл в планшетном формате ИФА и 1.6 нг/мл в формате микрочипа. Присутствие в пробах с дифтерийным токсином секретов из смывов носоглотки не снижало чувствительность определения токсина методом сандвич-ИФА. В процессе иммунизации мышей дифтерийным токсином и конъюгатом дифтерийного токсина с полистирольными микросферами было показано, что иммунизация животных конъюгатом приводит к формированию клонов гибридом, продуцирующих антитела исключительно к эпитопам А-фрагмента дифтерийного токсина, тогда как иммунизация нативным токсином приводит к образованию клонов гибридом, продуцирующих антитела преимущественно к эпитопам В-фрагмента.

Ключевые слова: иммуноферментный анализ; сандвич-анализ; биологический микрочип; А- и В-фрагменты дифтерийного токсина; дифтерийный токсин; моноклональные антитела.