СУБСТРАТНАЯ СПЕЦИФИЧНОСТЬ ДЕЗОКСИРИБОНУКЛЕОЗИДМОНОФОСФАТКИНАЗЫ БАКТЕРИОФАГА Т5 И ЕЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ДЛЯ СИНТЕЗА [α-32P]d/rNTP
© 2009 г. А. Ю. Скоблов*, Г. В. Микулинская**, С. А. Таран**, А. И. Мирошников*, С. А. Феофанов**, Ю. С. Скоблов*#
#Тел.: (495) 336-26-41; e-mail: [email protected]
*Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 ГСП, Москва, В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10; **Филиал Института биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Пущино, Московская обл.
Поступила в редакцию 21.04.2009 г. Принята к печати 05.05.2009 г.
Показано, что дезоксирибонуклеозидмонофосфаткиназа бактериофага Т5 (dNMP-киназа T5) способна фосфорилировать как d2CMP, так и нуклеотиды рибо-ряда: AMP, GMP, CMP, но не может фосфорилировать UMP. Определены Кm и kcat фермента для природных акцепторов фосфорильной группы. Показана возможность использования dNMP-киназы T5 для синтеза [α-32P]rNTP и [α-32P]dNTP в качестве универсального фермента, фосфорилирующего меченые r/dNMP.
Ключевые слова: дезоксирибонуклеозидмонофосфаткиназа бактериофага Т5; [α-32P]rNTP и [α-32P]dNTP, синтез.