ВЫДЕЛЕНИЕ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ IgA1-ПРОТЕИНАЗЫ ИЗ КУЛЬТУРЫ Neisseria meningitidis

© 2010 г. Е. Ю. Ягудаева*, Л. С. Жигис*^#, О. А. Разгуляева*, В. С. Зуева^*, Э. Э. Мельников*, В. П. Зубов*, Л. В. Козлов²*, А. М. Бичучер²*, О. В. Котельникова*, А. П. Аллилуев³*, А. Э. Аваков^4*, Л. Д. Румш*

^#Тел.: (495) 330-67-65; факс: (495) 335-10-11; e-mail: [email protected]

^*Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 ГСП, Москва, В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10;
²*ФГУН Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского, Москва;
^3*ГОУ ВПО Российский университет дружбы народов (медицинский факультет), Москва;
⁴*Филиал ФГУН (НПО "Микроген") предприятие по производству бактерийных препаратов им. Г.Н. Габричевского, Москва

Поступила в редакцию 25.05.2009 г. Принята к печати 24.06.2009 г.

Разработана методика получения очищенного препарата IgA1-протеиназы из культуры Neisseria meningitidis серогруппы А из трех инактивированных промежуточных продуктов производства вакцины против менингококковой инфекции: культуральной жидкости, а также супернатанта и осадка, полученных при осаждении бактериальных клеток цетавлоном. Чистоту полученных препаратов IgA1-протеиназы определяли методом электрофореза в ПААГ-SDS. Разработан иммуноферментный метод определения активности IgA1-протеиназы. Выход фермента с удельной активностью от 0.5 до 4 млн ед./мг составил около 600 мкг из 103 г цетавлонового осадка (40 л культуральной жидкости). Показана способность IgA1-протеиназы, выделенной из менингококка серогруппы А, защищать экспериментальных животных (мышей) при инфицировании менингококком серогруппы В.

Ключевые слова: IgA1-протеиназа, менингококк, выделение, ферментативная активность, иммуногенность.

Биоорг.химия 2010, 36 (1): 89-97