Обзорная статья

ПРОДУКЦИЯ in vitro «ТРЕХПЕТЕЛЬНЫХ» НЕЙРОТОКСИНОВ ИЗ ЯДА ЗМЕЙ С ВЫСОКИМ СОДЕРЖАНИЕМ ДИСУЛЬФИДНЫХ СВЯЗЕЙ. ПРОБЛЕМЫ И РЕШЕНИЯ

© 2010 г. Е. Н. Люкманова*^#, М. А. Шулепко*^,**, З. О. Шенкарев*, Д. А. Долгих*^,**, М. П. Кирпичников*^,**

^#Тел.: (495) 330-69-83; факс: (495) 330-69-83; e-mail: [email protected]

*Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 ГСП, Москва, В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10;
**Московский государственный университет, Москва

Поступила в редакцию 22.05.2009 г. Принята к печати 11.06.2009 г.

«Трехпетельные» нейротоксины из яда змей являются высокоспецифичными конкурентными ингибиторами никотинового ацетилхолинового рецептора (nAChR). Эти небольшие белки, имеющие β-структурную организацию, представляют огромный интерес как в качестве «инструмента» для изучения свойств nAChR, так и с точки зрения разработки новых лекарственных препаратов для лечения ряда болезней нервной системы. Однако продукция «трехпетельных» нейротоксинов in vitro чрезвычайно осложнена наличием в этих молекулах системы из 4–5 пространственно сближенных дисульфидных связей. Обзор содержит описание наиболее часто используемых современных подходов для экспрессии чужеродных генов в E. coli (прямая экспрессия, гибридная экспрессия, секреция), а также обсуждение возможных проблем и решений для продукции «трехпетельных» нейротоксинов. Отдельное внимание уделено методам получения изотопно-меченных вариантов нейротоксинов в E. coli. Предложенные решения будут также интересны и полезны для бактериальной продукции других белков, богатых дисульфидными связями.

Ключевые слова: α-нейротоксины; никотиновый ацетилхолиновый рецептор; «трехпетельные» белки; экспрессия в Escherichia coli.

Биоорг.химия 2010, 36 (2): 149-158