БЕТА-СПИРАЛЬНЫЙ ДОМЕН БАКТЕРИОФАГА Т4 УПРАВЛЯЕТ УКЛАДКОЙ ФРАГМЕНТА ДЛИННЫХ ХВОСТОВЫХ ФИБРИЛЛ В СОСТАВЕ ХИМЕРНОГО БЕЛКА

© 2010 г. Р. Н. Чупров-Неточин, Н. М. Файзуллина, Н. Н. Сыкилинда, М. Н. Симакова, В. В. Месянжинов, К. А. Мирошников^#

^#Тел./факс: (495) 336-60-22; e-mail: [email protected]

Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 ГСП, Москва, В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

Поступила в редакцию 15.05.2009 г. Принята к печати 22.05.2009 г.

Ключевая стадия заражения клетки Escherichia coli бактериофагом Т4 – связывание с поверхностью клетки-хозяина – определяется специфичностью белков длинных хвостовых фибрилл фага, в частности gp37. В природных условиях сборка и олигомеризация этого белка требует участия по крайней мере двух дополнительных белковых факторов – gp57A и gp38, что сильно затрудняет получение рекомбинантной формы gp37. Для преодоления этого препятствия была применена одна из современных белково-инженерных стратегий – создание химерного белка, имеющего в своем составе «белок-носитель», направляющий правильную сборку целевого белка. В этом качестве был использован тримерный β-спиральный домен другого белка фага Т4 – gp5. Было показано, что этот домен, представляющий собой жесткую тримерную полипептидную призму, обладает свойствами перспективного белка-носителя. К С-концу домена gp5 в единой рамке считывания был присоединен фрагмент белка gp37, имеющий в своем составе пять пентапептидных повторов Gly-X-His-X-His, определяющих связывание с рецепторами на поверхности бактериальной клетки. Полученный химерный белок образует тример с нативной конформацией gp37 и проявляет биологическую активность.

Ключевые слова: бактериофаг Т4, хвостовые фибриллы, фолдинг белка, белковая инженерия.

Биоорг.химия 2010, 36 (2): 193-199