РАЗРАБОТКА И ОПТИМИЗАЦИЯ СОПРЯЖЕННОЙ БЕСКЛЕТОЧНОЙ СИСТЕМЫ СИНТЕЗА ТРАНСМЕМБРАННОГО ДОМЕНА РЕЦЕПТОРНОЙ ТИРОЗИНКИНАЗЫ ErbB3

© 2010 г. Н. Ф. Хабибуллина*^,**, Е. Н. Люкманова**^,# Г. С. Копеина**, З. О. Шенкарев**, А. С. Арсеньев**, Д. А. Долгих*^,**^,# , М. П. Кирпичников*^,**

^#Тел.: (495) 335-28-88; факс: (495) 330-69-83; e-mail: [email protected], [email protected]

*Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, 119991, Москва, ГСП-1, Воробьевы горы;
**Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 ГСП, Москва, В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

Поступила в редакцию 09.02.2010 г. Принята к печати 15.02.2010 г.

Разработана сопряженная система бесклеточного синтеза на основе бактериального экстракта S30 из E.coli для продукции трансмембранного домена рецепторной тирозинкиназы человека ErbB3 (остатки с 632 по 675). Исследованы условия синтеза домена в растворимом виде в присутствии различных детергентов и в виде нерастворимого осадка трансляционной смеси. Подобраны условия очистки рекомбинантного домена, полученного с применением обоих подходов. Конечный выход целевого белка в оптимальных условиях составил 1.8–2.0 мг/мл трансляционной смеси.

Ключевые слова: сопряженная бесклеточная система синтеза; мембранные белки; тирозинкиназы.