ВЫДЕЛЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА РЕКОМБИНАНТНОГО ФРАГМЕНТА АЛЬФА-ФЕТОПРОТЕИНА ЧЕЛОВЕКА, СООТВЕТСТВУЮЩЕГО С-КОНЦЕВОМУ СТРУКТУРНОМУ ДОМЕНУ

© 2010 г. О. А. Шарапова*^#, Н. В. Позднякова*, Д. К. Лауринавичюте**, М. С. Юркова**, Г. А. Посыпанова***, С. М. Андронова**, А. Н. Федоров**, С. Е. Северин*, Е. С. Северин**

^#Тел.: (499)-613-13-30; факс: (499)-613-26-33; e-mail: [email protected]

*Московский научно-исследовательский институт медицинской экологии, 117638, Москва, Симферопольский бульвар, 8;
**Всероссийский научный центр молекулярной диагностики и лечения, Москва;
***Научно-исследовательский институт молекулярной медицины Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова, Москва

Поступила в редакцию 13.04.2010 г. Принята к печати 18.05.2010 г.

Альфа-фетопротеин (АФП) является основным онкофетальным белком человека. Его рецептор экспрессируется клетками различных видов опухолей, но не продуцируется нормальными клетками взрослого организма. В молекуле АФП участок связывания со своим рецептором находится в третьем домене. Конъюгаты природного АФП с различными цитостатиками ингибировали рост раковых клеток in vivo и in vitro. С-Концевой фрагмент АФП (с 404 по 595 а.о. полноразмерного белка) был клонирован и продуцирован в клетках E. coli штамма BL21(DE3). Уровень продукции белка составил не менее 150 мг с 1 литра культуры. Разработана высокоэффективная методика его выделения и ренатурации, так что выход белка составил не менее 50% с чистотой около 95%. Ренатурированный третий домен АФП специфически связывался и проникал в клетки, содержащие рецептор АФП. Полученный рекомбинантный третий домен АФП может быть использован в качестве носителя для адресной доставки лекарств к раковым клеткам.

Ключевые слова: альфа-фетопротеин человека; АФП; рефолдинг; адресная доставка.

Биоорг.химия 2010, 36 (6): 760-768