МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ЦИТОХРОМОВ P450 И ИХ ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ

© 2011 г. Н. Е. Москалева^#, В. Г. Згода^#, А. И. Арчаков

^#Тел.: (499) 246-84-65; e-mail: [email protected]; [email protected]

Учреждение РАМН Научно-исследовательский институт биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича РАМН, 119121, Москва, ул. Погодинская, 10

Поступила в редакцию 07.07.2010 г. Принята к печати 12.08.2010 г.

Содержание отдельных представителей подсемейств 1A, 3A, 1E, 2C, 2D цитохромов Р450 измерено методом мониторинга множественных реакций (MRM – Multiple Reaction Monitoring) при помощи масс-спектрометра с тройным квадруполем. Методику разрабатывали и тестировали на образцах микросом печени мышей контрольной группы и после индукции фенобарбиталом или метилхолантреном. Применение данной методики позволило провести масс-спектрометрическое измерение содержания отдельных изоформ P450 без использования изотопных меток и специальных дериватизирующих реагентов. Результаты изменения содержания определенных изоформ P450 коррелировали с изменением ферментативной активности, определенной при помощи изоформспецифичных маркерных субстратов.

Ключевые слова: количественная протеомика; цитохромы Р450, определение содержания изоформ, безметковый метод; масс-спектрометрия.