МЕХАНИЗМ ИНГИБИРОВАНИЯ АНГИОСТАТИНОМ АКТИВАЦИИ ПЛАЗМИНОГЕНА ЕГО ФИЗИОЛОГИЧЕСКИМИ АКТИВАТОРАМИ

© 2011 г. Р. Б. Айсина*^#, Л. И. Мухаметова*, Н. В. Присяжная*, Д. А. Гулин**, М. Ю. Левашов*, К. Б. Гершкович**

^#Факс: (495) 939-54-17; e-mail: [email protected]

*Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, химический факультет, 119992, Москва, Воробьевы горы;
**Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН, 119991, Москва, ул. Косыгина, 4

Поступила в редакцию 30.06.2010 г. Принята к печати 17.08.2010 г.

Изучено влияние ангиостатина К1-4.5 – фрагмента тяжелой цепи плазмина и мощного ингибитора ангиогенеза – на кинетические параметры (k_Pg и K_Pg) активации Glu-плазминогена человека под действием урокиназы (uPA), не обладающей сродством к фибрину, и фибринспецифичного тканевого активатора плазминогена (tPA). Ангиостатин не влиял на величину k_Pg, но повышал значение K_Pg активации плазминогена урокиназой. В случае фибринстимулированной активации плазминогена тканевым активатором наблюдалось уменьшение k_Pg и увеличение K_Pg активации с ростом концентрации ангиостатина. Полученные данные показывают, что ангиостатин является конкурентным ингибитором активаторной активности uPA, в то время как активаторную активность tPA он ингибирует по смешанному типу. Такое влияние ангиостатина на кинетические константы активации плазминогена урокиназой показывает, что ангиостатин дозозависимым образом замещает плазминоген в бинарном фермент-субстратном комплексе uPA−Pg. В случае фибринстимулированной активации плазминогена тканевым активатором ангиостатин дозозависимым образом вытесняет плазминоген как с поверхности фибрина, так и из фермент-субстратного комплекса tPA−Pg. Константы ингибирования (K_i) ангиостатином активаторных активностей uPA и tPA, определенные по методу Диксона, найдены равными: 0.59 ± 0.04 и 0.12 ± 0.05 мкМ, соответственно.

Ключевые слова: плазминоген; плазмин, урокиназа; тканевый активатор плазминогена; ангиостатин; ингибирование активации.