ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ДУПЛЕКС-СПЕЦИФИЧЕСКОЙ НУКЛЕАЗЫ КРАБА ДЛЯ БЫСТРОГО АНАЛИЗА ОДНОНУКЛЕОТИДНЫХ ПОЛИМОРФИЗМОВ И ВЫЯВЛЕНИЯ ДНК-МИШЕНЕЙ В КОМПЛЕКСНОМ ПРОДУКТЕ ПЦР

© 2011 г. И. А. Шагина*, Е. А. Богданова**, И. М. Альтшулер*, С. А. Лукьянов**, Д. А. Шагин*^,**^#

^#Тел./факс: (495) 988-40-86 доб. 730; e-mail: [email protected]

*ЗАО Евроген, Москва;
**Учреждение РАН Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 ГСП, Москва, В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

Поступила в редакцию 22.11.2010 г. Принята к печати 23.12.2010 г.

Предложен метод быстрого анализа однонуклеотидных полиморфизмов и выявления целевых клонов при клонировании сложных продуктов ПЦР с использованием дуплекс-специфической нуклеазы краба и универсального флуоресцентного зонда. Метод является альтернативой трудоемких процедур скрининга клонов с применением радиоактивно меченных зондов, рестриктного анализа с нанесением на гель и дорогостоящего секвенирования. Эффективность метода продемонстрирована в ряде модельных экспериментов.

Ключевые слова: дуплекc-специфическая нуклеаза, полимеразная цепная реакция, однонуклеотидные полиморфизмы.

Биоорг.химия 2011, 37 (4): 522-529