БАКТЕРИАЛЬНАЯ ПРОДУКЦИЯ ВОДОРАСТВОРИМОГО ДОМЕНА Lynx1 – ЭНДОГЕННОГО НЕЙРОМОДУЛЯТОРА НИКОТИНОВЫХ РЕЦЕПТОРОВ ЧЕЛОВЕКА
© 2011 г. М. А. Шулепко*, Е. Н. Люкманова*#, А. П. Криволапова*,**, И. Е. Кашеверов*, Д. А. Долгих*,***, В. И. Цетлин*, М. П. Кирпичников*,***
#Тел./факс: (495) 330-69-83; e-mail: [email protected]
*Учреждение РАН Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 ГСП, Москва, В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10; **Московский физико-технический институт (государственный университет), Долгопрудный, Московская обл.; ***Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, Москва
Поступила в редакцию 18.01.2011 г. Принята к печати 27.03.2011 г.
Мембраноассоциированный белок Lynx1 экспрессируется в центральной нервной системе человека и играет важную роль в регуляции активности никотинового ацетилхолинового рецептора. В настоящей работе получен и экспрессирован ген водорастворимого домена Lynx1 человека (ws-Lynx1). В миллиграммовых количествах ws-Lynx1 удалось получить только в составе цитоплазматических телец включения. С целью оптимизации выхода рекомбинантного белка был проведен поиск условий ренатурации выделенного из телец включения ws-Lynx1. Полученный ренатурированный белок охарактеризован методами масс-спектрометрии и КД-спектроскопии. Показано, что ws-Lynx1 является конкурентным ингибитором связывания [125I]-α-бунгаротоксина с мембранами из электрического органа ската Torpedo californica, содержащими никотиновый ацетилхолиновый рецептор мышечного типа (α12βγδ).
Ключевые слова: нейромодуляторы; Lynx, бактериальная продукция; никотиновый ацетилхолиновый рецептор.
Биоорг.химия 2011, 37 (5): 609-615