ИММОБИЛИЗАЦИЯ ГЛУТАТИОНА ПОСРЕДСТВОМ КОМПЛЕМЕНТАРНОГО КООРДИНАЦИОННОГО СВЯЗЫВАНИЯ

© 2011 г. П. Н. Болтовец*, А. А. Савченко*, А. П. Филиппов**, Б. А. Снопок*^#

^#Тел.:+380 44 525 52 46; факс: +380 44 525 61 82; e-mail: [email protected]

*Институт физики полупроводников им. В.Е. Лашкарева НАН Украины, 03028, Киев, просп. Науки, 41,Украина;
**Институт физической химии им. Л.В. Писаржевского НАН Украины, Киев, Украина

Поступила в редакцию 20.04.2010 г. Принята к печати 26.11.2010 г.

Предложен простой способ иммобилизации биологически важных молекул с большим числом функциональных фрагментов посредством селективного связывания их тиогрупп с карбоксильными группами на поверхности монослоя с участием ионов кадмия. Биофункциональные свойства таких архитектур исследованы методом поверхностного плазмонного резонанса на примере глутатиона (GSH), привитого к смешанным монослоям тиолов c терминальными группами карбоксильного (a) и метильного/гидроксильного (b) типов (a : b от 1 : 100 до 1 : 700). Сохранение биологически активной конформации глутатион-S-трансферазы (GST) после ее взаимодействия с GSH контролировали при помощи специфических анти-GST-антител. Показано, что матрица с CH₃-терминальными группами обладает значительным неспецифическим связыванием и не пригодна для формирования биофункционального слоя GST. В то же время структуры на основе ОН-матрицы демонстрируют специфическое взаимодействие GST–анти-GST, стехиометрия которого соответствует бидентатному связыванию. Рассмотренный простой способ иммобилизации может быть использован для создания функциональных поверхностных структур в аналитической биохимии и химическом анализе.

Ключевые слова: глутатион; ацетат кадмия; монослои самособирающиеся; GST; поверхностный плазмонный резонанс; иммобилизация ориентированная.

Биоорг.химия 2011, 37 (5): 616-626