АНАЛИЗ БИОХИМИЧЕСКИХ МАРКЕРОВ АПОПТОЗА КЛЕТОК MCF-7, ИНДУЦИРУЕМОГО РЕКОМБИНАНТНЫМ АНАЛОГОМ ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ПЕПТИДА ЛАКТАПТИНА
©2012 г. А.С. Фомин*#, О.А. Коваль*, Д.В. Семенов*, М.О. Потапенко*, Е.В. Кулигина*, Ю.Я. Кит**, В.А. Рихтер*
#Тел.: (383) 363-51-90 ; e-mail: [email protected]
*Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, 630090, Новосибирск, пр. ак. Лаврентьева 8; **Институт биологии клетки НАН Украины, Львов
Поступила в редакцию 22.06.2011 г. Принята к печати 18.07.2011 г.
Ранее из молока человека был выделен и охарактеризован пептид лактаптин, а также получен его генноинженерный аналог RL2, который, как и природный пептид, вызывает апоптотическую гибель клеток аденокарциномы молочной железы человека MCF-7. В работе проведен анализ биохимических маркеров апоптотической гибели клеток MCF-7, индуцируемой RL2. Методами проточной цитофлуориметрии и иммуноблотинга проведен анализ активации инициаторных и эффекторных каспаз, а также анализ апоптотических изменений цитоплазматической мембраны и трансмембранного потенциала митохондрий клеток MCF-7 под действием RL2. Установлено, что гибель клеток MCF-7, индуцируемая RL2, сопровождается характерным для апоптоза экспонированием фосфатидилсерина на поверхности плазматической мембраны клеток. Показано, что RL2 индуцирует диссипацию трансмембранного потенциала митохондрий клеток MCF-7 и приводит к активации инициаторных каспаз 8, 9 и эффекторной каспазы 7.
Ключевые слова: апоптоз; MCF-7; противоопухолевые пептиды; лактаптин; каспазы.