НОВЫЙ ПОДХОД К ИССЛЕДОВАНИЮ СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СВОЙСТВ БЕЛКОВ С НЕИЗВЕСТНЫМИ ФУНКЦИЯМИ

©2012 г. М.А. Горбачева*^,**^#, А.Г. Ярош*, П.В. Дороватовский*, Т. В. Ракитина*^,***, К.М. Бойко*^,**, Д.А. Корженевский*, А.В. Липкин*, В.О. Попов**, И.А. Шумилин****

^#Тел.: +7 (906) 695-53-60; e-mail: [email protected]

*НИЦ "Курчатовский институт", Москва, 123182, пл. Академика Курчатова, д. 1.;
**Учреждение РАН Институт биохимии им. А.Н. Баха, Москва;
***Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва, 117997, ул. Миклухо-Маклая, 16/10;
****Виргинский университет, г. Шарлоттсвилл, Виргиния, США

Поступила в редакцию: 20.06.2011 г. Принята к печати: 12.07.2011 г.

В бактериальной системе Escherichia coli осуществлена продукция трёх белков из экстремофильных бактерий: гипотетической монооксигеназы из Deinococcus radiodurans, гипотетической нуклеотидилтрансферазы из Thermotoga maritime и гипотетической оксидоредуктазы из Exiguobacterium sibiricum, а также белка-шаперона из Homo sapiens DJ-1. Подобраны условия выделения и очистки рекомбинантных белков, позволяющие получать целевые продукты экспрессии с чистотой не менее 96%. Определены условия кристаллизации, обеспечивающие стабильный рост кристаллов. Проведены рентгеноструктурные эксперименты с целью проверки качества кристаллов; разрешение полученных структурных данных составляло от 1.2 до 1.8 Å.

Ключевые слова: неизвестный лиганд; кристаллизация; рентгеноструктурный анализ.