МЕТАЛЛ-АФФИННАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ АЛКИЛИРОВАННЫХ АДДУКТОВ ГЕМОГЛОБИНА КРЫСЫ

© 2012 г. Я.А. Дубровский*, В.Д. Гладилович**, И.А. Краснов**, Е.П. Подольская**, Е.А.Мурашко*, В.Н. Бабаков*^#, Н.В. Гончаров*

^#Тел.: (812) 449-61-77; e-mail: [email protected]

*ФГУП «Научно-исследовательский институт гигиены, профпатологии и экологии человека» ФМБА России, 188663, Ленинградская обл., Всеволожский район, г.п. Кузьмоловский, ст. Капитолово, корп. №93;
**УРАН Институт аналитического приборостроения РАН, Санкт-Петербург

Поступила в редакцию 27.06.2011 г. Принята к печати 19.08.2011 г.

Осуществлена проверка гипотезы о возможности выделения пептидов глобина, содержащих ковалентную модификацию остатком сернистого иприта с применением метода металл-аффинной хроматографии на сорбенте, содержащем ионы Cu²⁺. С помощью времяпролетной MALDI-масс-спектрометрии продемонстрировано, что этим методом из триптического гидролизата глобина крысы, инкубированного с 60 мкМ HD, можно выделить пептиды, алкилированные сернистым ипритом (HD) по остаткам цистеина-126, -94 и глутаминовой кислоты-27, c MH⁺ соответственно 1444.62, 1561.66, 1676.78 Да. Из гидролизата глобина, инкубированного с 3 мкМ HD, удалось выделить алкилированный пептид с MH⁺ 1444.63 Да.

Ключевые слова: MALDI; сернистый иприт; гемоглобин; алкилирование.