ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ КОНЪЮГАТА ТРИЙОДТИРОНИНБИОТИН СО СВЯЗЫВАЮЩИМИ БЕЛКАМИ В ИММУНОАНАЛИТИЧЕСКИХ СИСТЕМАХ

© 2012 г. М. Е. Новаковский^#, И. И. Вашкевич, О. В. Свиридов

^#Тел.: 89160677815; e-mail: [email protected]

Институт биоорганической химии НАН Беларуси, 220141, Минск, ул. Купревича, 5/2

Поступила в редакцию 23.05.2011 г. Принята к печати 21.10.2011г.

Описана новая конструкция тест-системы для определения свободного 3,3’,5-трийод-L-тиронина (Т₃), гормона щитовидной железы, в сыворотке крови человека методами иммуноферментного (ИФА) и иммунорадиометрического (ИРМА) анализа. Для этой цели получен низкомолекулярный бифункциональный конъюгат, содержащий остатки Т₃ и биотина (Бт). Конъюгат (Т₃Бт) способен связываться биотиновой функцией с биотинсвязывающим белком на твердой фазе, а его T₃-часть – взаимодействовать с моноклональным антителом к Т₃ (анти-Т₃-МАт), меченным пероксидазой хрена или йодом-125, в системах ИФА и ИРМА, соответственно. Иммунохимическое взаимодействие затруднено, если в этой реакции участвует остаток Т₃ в составе предварительно сформированного твердофазного комплекса Т₃Бт с авидином. Компьютерное моделирование показало, что в таком комплексе углеводный компонент авидина экранирует остаток йодтиронина. Cвязывание Т₃Бт как с сайтами анти-Т₃-МАт, не занятыми Т₃, так и с твердофазным авидином достигалось отсроченным внесением Т₃-Бт в контейнеры с иммобилизованным авидином, в которых предварительно соинкубировались меченое анти-Т₃ МАт и анализируемая проба Т₃.

Ключевые слова: конъюгат трийодтиронин-биотин; авидин; стрептавидин; свободный Т₃; иммуноанализ.

Биоорг.химия 2012, 38 (4): 449-457