Письма Редактору
ПОЛУЧЕНИЕ СЕКРЕТИРУЕМЫХ БЕЛКОВ СЕМЕЙСТВА NOGGIN И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИХ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ
© 2013 г. Ф. М. Ерошкин, А. В. Байрамов, О. В. Аверьянова, Е. А. Соловьева, М. В. Серебрякова, А. Г. Зарайский, Н. Ю. Мартынова#
#Тел: (495)-336-86-11; e-mail: [email protected]
Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 ГСП, Москва, В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10
Поступила в редакцию 08.10.2012 г. Принята к печати 16.10.2012 г.
Разработаны методики получения рекомбинантных физиологически активных белков семейства Noggin (Noggin1 и Noggin2) шпорцевой лягушки Xenopus laevis, способных взаимодействовать с факторами BMP суперсемейства TGF-beta. Для экспрессии белков Noggin1 и Noggin2 были созданы конструкции, позволяющие нарабатывать их с микроинъецированных синтетических мРНК непосредственно в клетках развивающихся зародышей шпорцевой лягушки, а также в прокариотической системе экспрессии. Целевые белки содержали на N-конце по три олигопептидных Мус-эпитопа. Введение таких “меток” позволило сравнить уровень экспрессии белков Noggin1 и Noggin2, выделить их на аффинном иммуносорбенте и показать биологическую активность выделенных Noggin-белков путем анализа их способности связывать фактор BMP4 суперсемейства TGF-beta методом коиммунопреципитации.
Ключевые слова: Noggin1; Noggin2; сигнальный каскад; люциферазный репортер; эмбриогенез.