УЧАСТИЕ КАСПАЗ В КЛЕТОЧНОЙ ГИБЕЛИ, ИНДУЦИРОВАННОЙ GD2-СПЕЦИФИЧНЫМИ АНТИТЕЛАМИ

© 2014 г. П. А. Вишнякова*, И. И. Доронин*, И. В. Холоденко*^, **, Д. Ю. Рязанцев*, И. М. Молотковская*, Р. В. Холоденко*^{, #}

^#Тел.: +7 (495) 330-72-56, e-mail: [email protected]

*ФГБУН Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской Академии Наук, 117997 ГСП, Москва, В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10
**ФГБУ “Научно-исследовательский институт биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича” Российской академии медицинских наук, 119121, Москва, ул. Погодинская, д. 10, стр. 8

Поступила в редакцию 23.10.2013 г. Принята к печати 13.11.2013 г.

Изучен вклад основных каспаз в цитотоксические эффекты, вызываемые моноклональными антителами 14G2a, специфичными к опухолеассоциированному ганглиозиду GD2, в клетках мышиной лимфомы EL-4. Зарегистрирована конститутивная экспрессия генов прокаспаз в клетках EL-4. Так, инкубация клеток с антителами 14G2a не приводила к значимому увеличению синтеза прокаспаз, не усиливалась также их ферментативная активность, что было показано с использованием флуоресцентно-меченых субстратов каспаз. При одинаковом уровне клеточной гибели активность каспазы-3 и каспазы-9 в клетках, инкубированных c антителами 14G2a, в 7.5 и в 3 раза ниже, чем в клетках, обработанных стауроспорином. Общий ингибитор каспаз (Z-VAD-FMK), а также ингибитор каспазы-3, уменьшали цитотоксические эффекты, индуцированные антителами 14G2a, на 9–16% и 6–13% соответственно. В тех же условиях уровень апоптоза, индуцированного стауроспорином, падал на 55–65%. Ингибиторы инициаторных каспаз-8 и -9 не влияли на клеточную гибель, запускаемую антителами. Ингибиторный анализ показал также, что каспазы не участвуют в запуске первых этапов клеточной гибели, индуцированной антителами 14G2a, проявляющихся в уменьшении клеточного объема и в нарушении проницаемости плазматической мембраны. Таким образом, каспазы не играют ключевую роль в клеточной гибели, индуцированной антителами к GD2, их незначительная ферментативная активность не определяет механизм гибели клеток, опосредованной воздействием на опухолеассоциированный ганглиозид GD2.

Ключевые слова: GD2, опухолеассоциированные ганглиозиды, каспазы, клеточная гибель, апоптоз, моноклональные антитела.

Биоорг. химия 2014, 40 (3): 305-314