АНАЛИЗ БЕЛКОВЫХ ПАРТНЕРОВ БЕЛКА ЯДРЫШКА ЧЕЛОВЕКА SURF6 В КЛЕТКАХ HeLa МЕТОДОМ АФФИННОЙ АДСОРБЦИИ

^#Тел.: +7 (495) 779-23-66; факс: +7 (495) 779-23-66; e-mail: [email protected]

ФГБУН Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997, Москва, ГСП-7, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

Поступила в редакцию 30.09.2013 г. Принята к печати 24.02.2014 г.

Белки семейства SURF6 – это эволюционно-консервативные белки “домашнего хозяйства” эукариот, однако функциональное значение SURF6 человека и его белковые партнеры до сих пор не установлены. В настоящей работе для ответа на эти вопросы мы использовали метод аффинной адсорбции (GST pull-down), а в качестве акцепторов – слитые с глутатион-S-трансферазой (GST) рекомбинантный SURF6 человека и рекомбинантный консервативный С-концевой домен Surf6 мыши (Surf6-dom мыши), имеющий 85% подобия с С-консервативным доменом SURF6 человека. Результаты работы показали, что GST-SURF6 в клетках человека HeLa взаимодействует c факторами процессинга рРНК (В23-нуклеофозмином, нуклеолином, EBP2), а также с кофактором РНК-полимеразы I, белком UBF. Эти же белковые партнеры связывались с GST-Surf6-dom. Данные наблюдения являются первыми экспериментальными свидетельствами в пользу участия SURF6 человека в биогенезе рибосом, включая транскрипцию рДНК и процессинг рРНК. Набор белковых партнеров GST-Surf6-dom в клетках HeLa указывает, кроме того, на возможное взаимодействие SURF6 человека c ядрышковыми и ядерными белками других функциональных групп, т.е. на его многофункциональность.

Ключевые слова: SURF6, биогенез рибосом, ядрышко.

Биоорг. химия 2014, 40 (4): 421-432