ПОЛУЧЕНИЕ АНТИТЕЛ, СПОСОБНЫХ РАСПОЗНАВАТЬ АМИНОКИСЛОТНУЮ ЗАМЕНУ Glu/Lys В ПОЛОЖЕНИИ 129 СУРВИВИНА

© 2014 г. Т. Д. Волкова*^{, #}, Е. В. Аскарова*^, **, Д. О. Короев*, А. В. Камынина*, М. П. Филатова*, И. Ю. Якупов*^, **, О. М. Вольпина*

^#Тел.: +7 (495) 336-57-77; e-mail: [email protected]

*ФГБУН Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997, Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10
**Московский государственный университет тонких химических технологий им. М.В. Ломоносова, Москва

Поступила в редакцию 27.11.2013 г. Принята к печати 26.12.2013 г.

Сурвивин – это онкофетальный белок, являющийся ингибитором апоптоза и принимающий участие в регуляции клеточного деления. Функции сурвивина зависят от его мономер-димерного состояния. Вследствие природного полиморфизма, в положении 129 аминокислотной последовательности сурвивина может находиться остаток Glu либо Lys. Последний способен к ацетилированию, и только белок, содержащий ацетилированный остаток Lys¹²⁹, склонен к образованию димера. Таким образом, антитела, распознающие аминокислотную замену Glu129Lys, могут служить инструментом в структурно-функциональных исследованих сурвивина. Для получения целевых антител были синтезированы фрагменты сурвивина, включающие остаток 129, проведена иммунизация кроликов синтетическими пептидами и аффинная очистка полученных антител на сефарозе, конъюгированной с соответствующими пептидами. С помощью иммуноферментного анализа и иммуноблота было показано, что полученные аффинно-очищенные антитела способны распознавать аминокислотную замену Glu129Lys в последовательности рекомбинантного и эндогенного сурвивина.

Ключевые слова: сурвивин, полиморфизм E129K, синтетические пептиды, антитела.

Биоорг. химия 2014, 40 (4): 443-450