ОПТИМИЗАЦИЯ ПРОЦЕДУРЫ КОЛИЧЕСТВЕННОГО АНАЛИЗА ОКСИДА АЗОТА ДЛЯ ЕГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ В СРЕДЕ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КЛЕТОК МЛЕКОПИТАЮЩИХ

© 2015 г. М. Г. Акимов^#, Е. В. Фомина-Агеева, В. В. Безуглов

^#Тел.: +7 (495) 330-65-92; e-mail: [email protected]

ФГБУН Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 ГСП, Москва, В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

Поступила в редакцию 21.01.2013 г. Принята к печати 06.05.2014 г.

Оптимизирована процедура определения оксида азота в виде нитрит-иона, пригодная для количественного анализа его продуцирования культурой клеток млекопитающих. Установлено, что оптимальные результаты дает метод Гриса, адаптированный для микрообъемов, после предварительной процедуры восстановления NO₃^–, образовавшегося в среде анализа из нитрит-иона, до определяемого NO₂^– с помощью неактивированного кадмия. Метод верифицирован на культуре клеток крысиной глиомы С6. Разработанный метод пригоден для определения оксида азота в 96- и 48-луночных культуральных планшетах; предел детектирования составляет 2.1 ± 0.1 мкМ для NO₂^– и 2.9 ± 0.1 мкМ для NO₃^–.

Ключевые слова: оксид азота, нитрат, нитрит, кадмий, сульфат гидразина, метод Гриса.