СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИХ МЕТОДИК ОПРЕДЕЛЕНИЯ МАССОВОЙ ДОЛИ БЕЛКА В ОБРАЗЦАХ ПЕКТИНОВЫХ ПОЛИСАХАРИДОВ
© 2015 г. С. А. Пономарева*, В. В. Головченко*, #, О. А. Патова*, Е. В. Ванчикова**, Ю. С. Оводов*
#Тел.: +7 (8212) 24-10-01, факс: +7 (8212) 24-10-01, e-mail: [email protected]
*Институт физиологии, Коми НЦ УрО РАН, 167982, Сыктывкар, ул. Первомайская, 50; **Институт биологии, Коми НЦ УрО РАН, 167982, Сыктывкар, ул. Коммунистическая, 28
Поступила в редакцию 29.05.2014 г. Принята к печати 30.09.2014 г.
С целью анализа достоверности определения массовой доли белка в образцах пектиновых полисахаридов по оптической плотности растворов в ультрафиолетовой и видимой области спектра, проведено сравнение одиннадцати методик, называемых методами: Флореса, Лоури, Бредфорд, Седмака, Руэмана (нингидриновая реакция), ультрафиолетовой спектрофотометрии, с реактивом Бенедикта, с реактивом Несслера, с амидовым черным, с бицинхониновым реактивом, биуретовым методом. В результате выявлена недостаточная чувствительность семи из перечисленных методов, не позволяющая рекомендовать их для этих целей. Методы Лоури, Бредфорд, Седмака и с реактивом Несслера можно использовать для определения содержания белка в образах пектиновых полисахаридов, причем метод Бредфорд может быть рекомендован для характеристики образцов пектиновых полисахаридов, если массовая доля белка в них не превышает 15%, и метод Лоури – для образцов с массовой долей белка более 15%.
Ключевые слова: пектиновые полисахариды, спектрофотометрические методики определения белка, метрологическое исследование, прецизионность, правильность.
Биоорг. химия 2015, 41(2): 154–161