ИНФРАКРАСНЫЙ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ БЕЛОК iRFP КАК АКЦЕПТОР ДЛЯ РЕЗОНАНСНОГО ПЕРЕНОСА ЭНЕРГИИ ВОЗБУЖДЕНИЯ

© 2015 г. О. А. Злобовская*, К. С. Саркисян*, К. А. Лукьянов^#, *^, **

^#Тел.: +7 (499) 742-81-22; e-mail: [email protected]

*Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997, Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10;
**Научно-исследовательский институт биомедицинских технологий Нижегородской государственной медицинской академии, 603005, Нижний Новгород, пл. Минина, 10/1

Поступила в редакцию 24.11.2014 г. Принята к печати 08.12.2014 г.

Исследована возможность использования инфракрасного флуоресцентного белка iRFP на основе бактериофитохрома в качестве акцептора для ферстеровского резонансного переноса энергии (Fӧrster resonance energy transfer, FRET). В качестве доноров энергии использовали GFP-подобные дальнекрасные флуоресцентные белки mKate2, eqFP650 и eqFP670. С целью тестирования FRET создали генно-инженерные конструкции для экспрессии в бактериях, кодирующие донорный и акцепторный белки, соединенные гептадекапептидным линкером. Эффективность FRET оценивали in vitro на выделенных белках по росту эмиссии донора после разрезания линкера. Из трех тестированных конструкций наиболее эффективный перенос энергии (приблизительно 30%) показала пара eqFP650-iRFP.

Ключевые слова: флуоресцентный белок, GFP, iRFP, генетически кодируемый сенсор, FRET.