НЕЙТРАЛИЗУЮЩИЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ И ХИМЕРНЫЕ АНТИТЕЛА К ИНТЕРФЕРОНУ-γ ЧЕЛОВЕКА

© 2015 г. М. В. Ларина^#, *, Т. К. Алиев*, О. Н. Солопова**, Л. П. Позднякова***, С. В. Коробова****, С. А. Якимов*, П. Г. Свешников***, Д. А. Долгих*^, ****, М. П. Кирпичников*^, ****

^#Тел.: +7 (495) 330-66-38, e-mail: [email protected]

*ФГБУН Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 ГСП, Москва, В-437, ул. Миклухо-Маклая, 16/10;
**МГУ им. М.В. Ломоносова, химический факультет, Москва;
***Всероссийский научный центр молекулярной диагностики и лечения, Москва;
****ФГБУ “ГНЦ Институт Иммунологии” ФМБА России, Москва;
*****МГУ им. М.В. Ломоносова, биологический факультет, Москва

Поступила в редакцию 12.08.2014. Принята к печати 01.11.2014 г.

Аутоиммунные заболевания – это хронические заболевания, при которых иммунный ответ направлен на собственные антигены организма, что приводит к повреждению тканей и нарушению их нормального функционирования. Нередко эти заболевания приводят к инвалидности и смерти пациентов. На сегодняшний день для направленной терапии аутоиммунных заболеваний успешно применяется ряд моноклональных антител к провоспалительным цитокинам и их рецепторам. Одной из перспективных мишеней для лечения аутоиммунных заболеваний является интерферон-γ (IFN-γ), цитокин, играющий ключевую роль в дифференцировке Th1-клеток, активации макрофагов и воспалении. В работе был получен набор из 5 моноклональных антител (мАТ) к IFN-γ человека. Для получения прототипа терапевтического препарата исследованы аффинность полученных антител к IFN-γ и их способность к блокированию индуцированной IFN-γ активности. На основании полученных данных для химеризации было выбрано мАТ F1, комплекс которого с IFN-γ характеризуется константой диссоциации 1.7 нМ; кроме того, это антитело проявило низкое значение IC₉₀ (8.9 ± 2.0 нМ) при ингибировании индуцируемой IFN-γ экспрессии антигена HLA-DR на поверхности клеток линии U937. Был сконструирован бицистронный вектор для продукции Fab-фрагмента химерного антитела F1 chim в клетках E. coli. Полученный рекомбинантный Fab-фрагмент химерного антитела F1 нейтрализует IFN-γ-индуцируемую активность in vitro и его комплекс с IFN-γ характеризуется константой диссоциации 1.8 нМ.

Ключевые слова: интерферон-γ, терапевтические моноклональные антитела, рекомбинантные антитела.