НОВЫЙ ПРОСТОЙ МЕТОД ПОЛУЧЕНИЯ АНАЛИТИЧЕСКИХ КОЛИЧЕСТВ МЕЧЕНЫХ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ ДЛЯ ПОДБОРА ПАР В СЭНДВИЧ-ВАРИАНТЕ ИФА

© 2015 г. М. М. Зарипов*, Г. В. Афанасьева*, К. А. Глухова*, Ю. А. Тризна*, А. С. Глухов*, И. П. Белецкий**, О. В. Прусакова*^{, #}

^#Тел.: +7 (4967) 73-94-41; факс: +7 (4967) 33-05-53; e-mail: [email protected]

*ФГБУН Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, 142290, Московская область, г. Пущино, ул. Институтская, 3;
**ООО “Инноград Пущино”, г. Пущино

Поступила в редакцию 12.11.2014 г. Принята к печати 12.12.2014 г.

Разработан простой и быстрый метод получения меченых моноклональных антител (мкАТ) из культуральной жидкости гибридом в количествах, достаточных для подбора пар антител в сэндвич-варианте иммуноферментного анализа (ИФА) и определения их аффинности. Метод основан на предложенном впервые подходе, который заключается в аффинном связывании мкАТ из культуральной жидкости гибридом с молекулами антигена, сорбированными в 8-луночном планшете, и последующем кратковременном мечении образованных комплексов биотином. На примере мкАТ к рекомбинантному белку вируса осповакцины A27L показано, что количества меченных таким образом антител в лунке достаточно для проверки 25 потенциальных партнеров в сэндвич-варианте ИФА. Метод позволяет экономично и эффективно осуществлять подбор пар мкАТ, не имея больших количеств культуральной или асцитной жидкости и без проведения процедур выделения антител.

Ключевые слова: моноклональные антитела, сэндвич-вариант ИФА, биотин, вирус осповакцины.