СТРЕПТОКИНАЗА И СТАФИЛОКИНАЗА: РАЗЛИЧИЯ КИНЕТИКИ И МЕХАНИЗМА ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ С ПЛАЗМИНОГЕНОМ, ИНГИБИТОРАМИ И ФИБРИНОМ

^#Тел: +7 (495) 939-50-83, факс: +7(495) 939-54-17, e-mail: [email protected]

*ФГБОУ Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова, Химический факультет, 119992, Москва, Ленинские горы;
**ФГБУН Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН, 119991, Москва

Поступила в редакцию 19.12.2014 г. Принята к печати 08.04.2015 г.

Проведено сравнительное in vitro-исследование кинетики различных реакций, вовлекаемых в процесс тромболизиса, инициируемый стрептокиназой (SK) и рекомбинантной стафилокиназой (STA). При взаимодействии плазминогена (Pg) с SK или STA в эквимолярных соотношениях скорость образования и удельная эстеразная активность комплекса плазмина (Pm) c SK (Pm•SK) была выше, чем комплекса Pm•STA. При этом каталитическая эффективность (k_cat /K_m) гидролиза хромогенных субстратов плазмина комплексом Pm•SK была в 2 раза выше, чем комплексом Pm•STA. В отсутствие фибрина каталитическая эффективность (k_Pg/K_Pg) активации гликоформы II Glu-плазминогена и Lys-плазминогена комплексом Pm•SK была выше, чем комплексом Pm•STA. Однако присутствие фибрина повысило k_Pg/K_Pg активации обоих плазминогенов гликоформы II комплексом Pm•STA более значительно, чем комплексом Pm•SK благодаря снижению K_Pg. Показано, что, в отличие от STA (15.5 кДа), молекула SK (47 кДа)

создает значительные стерические затруднения для взаимодействия плазмина в комплексе Pm•SK с белковыми ингибиторами. Кроме того, SK вызывала большую деградацию фибриногена в плазме, чем STA. Комплексы Pm•SK и Pm•STA лизировали фибриновые сгустки в буфере с близкими скоростями, в то время как скорости лизиса плазменных сгустков, погруженных в плазму, комплексом Pm•STA была значительно выше, чем комплексом Pm•SK. Обнаружено, что видовая специфичность STA и SK определяется, в основном, скоростью образования и эффективностью комплексов Pm•SK и Pm•STA в активации аутологического плазминогена. Эффективность лизиса плазменных сгустков млекопитающих падала в ряду: человек > собака > кролик для SK и собака > человек > кролик для STA. Полученные результаты показывают, что в чистой системе SK является более эффективным активатором плазминогена, чем STA. В системе, содержащей фибрин и α2AP, активаторная и фибринолитическая активности STA выше, чем SK, благодаря повышенной стабильности в плазме и фибрин-специфичности STA, быстрой реакции комплекса Pm•STA с α₂AP и способности STA к рециклизации в присутствии α₂AP.

Ключевые слова: стрептокиназа, стафилокиназа, активация плазминогена, ингибирование, стабильность, фибринолиз, фибриногенолиз.

БИООРГАНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ, 2015, том 41, № 5, с. 565–578