ВЛИЯНИЕ МУТАЦИЙ В ИНСЕРЦИОННОМ ДОМЕНЕ АТР-ЗАВИСИМОЙ Lon-ПРОТЕАЗЫ ИЗ E. coli НА ЕЕ ФУНКЦИОНИРОВАНИЕ¹

© 2015 г. А. М. Куджаев, А. Г. Андрианова, О. В. Серова, В. А. Архипова, Е. С. Дубовцева, Т. В. Ротанова^#

^#Тел.: +7 (495) 335-42-22; факс: +7 (495) 335-71-03; e-mail: [email protected]

ФГБУН Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997, Москва, ГСП-7, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

Поступила в редакцию 07.04.2015 г. Принята к печати 22.04.2015 г.

АТР-зависимая LonА-протеаза из E. coli (Ес-Lon), относящаяся к суперсемейству ААА⁺-белков, является ключевым участником системы контроля качества клеточного протеома. Ес-Lon функционирует как гомогексамер и расщепляет аномальные и дефектные полипептиды, а также ряд регуляторных белков по процессивному механизму. Субъединица Ес-Lon включает АТР-азный и протеолитический компоненты (ААА⁺-модуль и Р-домен), а также уникальную для ААА⁺-белков некаталитическую область, образованную N-концевым (N) и инсерционным α-спирализованным (HI(СС)) доменами. С целью выявления роли HI(СС)-домена в функционировании фермента получены мутанты Ес-Lon с заменами остатков R164, R192 и Y294, локализованных в этом домене, и изучены их свойства. Показано, что С-концевая часть НI(СС)-домена аллостерически влияет на эффективность функционирования АТР-азного и протеолитического центров фермента, а его coiled-coil(СС)-область вовлечена во взаимодействие с белковым субстратом.

Ключевые слова: ААА⁺-белки, АТР-зависимый протеолиз, Lon-протеазы, доменная организация, coiled-coil-область, сайт-направленный мутагенез, E. coli.

______________________
¹Статья публикуется по материалам сообщения, представленного на VII Российском симпозиуме “Белки и пептиды”; Новосибирск, 12–17 июля 2015 г.

БИООРГАНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ, 2015, том 41, № 5, с. 579–586