РЕКОМБИНАНТНАЯ ДЕСТАБИЛАЗА МЕДИЦИНСКОЙ ПИЯВКИ: ПОЛУЧЕНИЕ И СВОЙСТВА¹

© 2016 г. А. С. Курдюмов*^{, #}, В. А. Манувера*^, **, Д. Н. Ахаев***, И. П. Баскова***, В. Н. Лазарев*^, **

^#Тел.: +7 (499) 255-28-46; e-mail: [email protected]

*НИИ Физико-химической медицины ФМБА России, 119435 Москва, Малая Пироговская 1а;
**Московский физико-технический институт (ГУ), 141700, Московская обл., Долгопрудный, Институтский пер. 9;
***Биологический факультет МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия, 119991

Поступила в редакцию 31.03.2015 г. Принята к печати 20.07.2015 г.

Разработан процесс получения в клетках Escherichia coli активной рекомбинантной дестабилазы медицинской пиявки. В ходе работы получены плазмиды, кодирующие аналог природной дестабилазы, а также формы белка, имеющие аффинную полигистидиновую метку, присоединенную к N- и/или С-концу полипептида. Получены штаммы-продуценты различных форм белка, оптимизирован процесс их культивирования. Подобраны условия ренатурации рекомбинантных форм дестабилазы методами диализа и на хроматографическом сорбенте. Исследована ее мурамидазная активность по отношению к клеточным стенкам бактерий Мicrococcus lysodeikticus и литическая активность по отношению к клеткам E. coli. Определена зависимость активностей от pH и ионной силы раствора. Показана общая антибактериальная активность дестабилазы по отношению к клеткам E. coli.

Ключевые слова: лизоцим, изопептидаза, дестабилаза, Hirudo medicinalis, рекомбинантный белок.

_________________________

¹Статья публикуется по материалам сообщения, представленного на VII Российском симпозиуме "Белки и пептиды"; Новосибирск, 12-17 июля 2015 г.

Биоорг. химия 2016, 42 (1): 50-61