УЧАСТИЕ N-КОНЦЕВОЙ ОБЛАСТИ И ХАРАКТЕРИСТИЧЕСКОГО COILED-COIL-ФРАГМЕНТА LonА-ПРОТЕАЗЫ ИЗ E. COLI В ЕЕ ФУНКЦИОНИРОВАНИИ И ПОДДЕРЖАНИИ СТРУКТУРЫ

© 2017 г. А. Г. Андрианова, А. М. Куджаев, Е. С. Дубовцева, Т. В. Ротанова^#

^#Тел.: +7 (495) 335-42-22; факс: (495)335-71-03; эл. почта: [email protected]

ФГБУН Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997, Москва, ул. Миклухо-Маклая 16/10

Поступила в редакцию 05.12.2016 г. Принята к печати 19.12.2016 г.

DOI: 10.7868/S0132342317040029

Для исследования участия N-концевой области, включащей характеристический coiled-coil(СС)-участок, в функционировании LonA-протеазы из E. coli (ЕсLon) получены и охарактеризованы укороченная форма Lon173, не содержащая N-концевого фрагмента 1–172, и делеционная форма dCCLon, утратившая СС-участок 173–283. Проведен сравнительный анализ свойств полноразмерной EcLon-протеазы, форм dCC-Lon и Lon173, а также полученной ранее формы Lon235, сохранившей С-концевую часть (235–280) СС-участка. Показано, что фрагмент (1–280) играет существенную роль в формировании АТР-азного центра и в поддержании стабильной конформации EcLon-протеазы. Установлено, что фрагмент (107–172) имеет исключительное значение для реализации процессивного механизма АТР-зависимого протеолиза.

Ключевые слова: ААА+-белки, LonA-протеазы, АТР-зависимый протеолиз, роль N-концевой области.

Биоорг. химия 2017, 43 (4): 357-366