МЕЧЕННЫЕ Eu(III) НАНОЧАСТИЦЫ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТИРЕОТРОПНОГО ГОРМОНА МЕТОДОМ ФОСФОРЕСЦЕНТНОГО АНАЛИЗА С ВРЕМЕННЫМ РАЗРЕШЕНИЕМ

© 2017 г. В. Г. Помелова*^{, #}, Н. С. Осин**, Т. А. Быченкова**, Д. В. Парамонов*, Т. С. Кострюкова*

^#Тел: +7 (916) 530-53-57; эл. почта: [email protected]

*ФГУП “Государственный научно-исследовательский институт биологического приборостроения”, Россия, 125424, Москва, Волоколамское шоссе 75/1;
**ЗАО “ИММУНОСКРИН”, Москва, Россия

Поступила в редакцию 15.07.2016 г. Принята к печати 16.08.2016 г.

DOI: 10.7868/S0132342317030174

Полимерные наночастицы, включающие фосфоресцентную метку (хелатные комплексы ионов Eu³⁺), применены при разработке высокочувствительного фосфоресцентного анализа (ФОСФАН^ТМ) для определения тиреотропного гормона (TSH) человека. Фосфоресценцию регистрировали в режиме временного разрешения (TRF) с микрозон (микроэрреев), напечатанных на дне лунки стандартных полистирольных микропланшетов. Для определения TSH использовали бумажные диски (диаметром 3.2 мм), выбитые панчером из пятен капиллярной крови, высушенной на фильтровальной бумаге. Основные аналитические и функциональные характеристики нового метода и коммерческого набора реагентов для измерения уровня TSH в сухих пятнах крови от новорожденных были сопоставимы. Оба метода позволяли правильно определить концентрацию гормона в диапазоне от 0 до 250 мкМЕ/мл крови. Аналитическая чувствительность детекторной системы на основе меченых Eu³⁺ наночастиц составила 0.46±0.1 мкМЕ/мл (соответствует примерно 17 фмоль/л), что было сопоставимо с показателями наиболее чувствительных методов. Эффект матрикса был выражен незначительно. Коэффициент вариации результатов (до 20%) был выше, чем в коммерческом наборе. Разработанная нами новая высокочувствительная тестовая система может быть интегрирована в состав мультиплексных тестов, основанных на технологии ФОСФАН, для одновременного обнаружения маркеров нескольких врожденных заболеваний у новорожденных.

Ключевые слова: наночастицы, фосфоресцентный анализ (ФОСФАН, PHOSPHAN), микрозоны (microarrays), люминесценция (флуоресценция) с временным разрешением (TRF), хелаты европия, тиреотропный гормон (TSH).

Биоорг. химия 2017, 43 (4): 367-376