ДЕЙСТВИЕ B-СУБЪЕДИНИЦЫ ХОЛЕРНОГО ТОКСИНА НА КЛЕТКИ МЫШИНОЙ МАКРОФАГАЛЬНОЙ ЛИНИИ RAW 264.7

© 2019 г. Е. В. Наволоцкая*^{, #}, В. Б. Садовников*, Д. В. Зинченко*, В. И. Владимиров*^, **, Ю. А. Золотарев***, В. М. Липкин****, А. Н. Мурашев*

^#Тел.: +7 (4967) 73-66-68; факс: +7(4967)33-05-27; эл. почта: [email protected]

*Филиал Федерального государственного бюджетного учреждения науки Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Россия, 142290, Московская область, г. Пущино, проспект Науки, 6;
**Пущинский государственный естественно-научный институт, Россия, 142290, Московская область, г. Пущино, проспект Науки, 3;
***Федеральное государственное бюджетное учреждения науки Институт молекулярной генетики РАН, Россия, 123182, г. Москва, пл. акад. Курчатова, 2;
****Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Россия, 117997, Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

Поступила в редакцию 20.06.2018 г. После доработки 10.08.2018 г. Принята к публикации 18.09.2018 г.

DOI: 10.1134/S013234231902009X

Установлено, что ¹²⁵I-меченная B-субъединица холерного токсина ([¹²⁵I]CT-B, удельная активность 98 Ки/ммоль) с высоким сродством связывается с клетками мышиной макрофагальной линии RAW 264.7 (K_d 2.3 нМ). Связывание [¹²⁵I]CT-B ингибировали немеченые интерферон-α₂ (IFN-α₂), тимозин-α₁ (TM-α₁) и синтетический пептид LKEKK, соответствующий последовательностям 16–20 TM-α₁ и 131–135 IFN-α₂ человека (K_i 0.9, 1.1 и 1.4 нМ соответственно), но не ингибировал немеченый синтетический пептид с инвертированной последовательностью KKEKL (K_i > 1 мкМ). В диапазоне концентраций 10–1000 нМ CT-B и пептид LKEKK дозозависимо увеличивали продукцию клетками оксида азота (NO), активность внутриклеточной растворимой гуанилатциклазы (sGC), а также способность клеток к адгезии, распластыванию и перевариванию бактерий вирулентного штамма Salmonella typhimurium 415 in vitro. Протестированный параллельно пептид KKEKL был неактивен. Таким образом, связывание CT-B и пептида LKEKK с рецептором на клетках линии RAW 264.7 приводит к увеличению их NO-синтазной, гуанилатциклазной и фагоцитарной активности.

Ключевые слова: пептиды, рецепторы, B-субъединица холерного токсина, клеточная линия RAW 264.7

Биоорг. химия 2019, 45 (3): 288-294