ВЛИЯНИЕ ЭКСПРЕССИИ СЕКВЕСТОСОМЫ-1/p62 НА АУТОФАГИЮ ФИБРОБЛАСТОВ НАДКОСТНИЦЫ ЗУБА ЧЕЛОВЕКА, ВЫЗВАННУЮ Porphyromonas gingivalis1
c 2020 Han Su*, **, Yibo Zhang***, Yongju Chen*, **, Bingjun Fan*, **, Bo Hao****, and Xin Li**, #
#Эл. почта: [email protected]
*School of Stomatology, Jinzhou Medical University, Jinzhou, Liaoning, 121000 China; **The Second Affiliated Hospital of Jinzhou Medical University, Jinzhou, Liaoning, 121000 China; ***Department of Pathogeny Biology, Jinzhou Medical University, Jinzhou, Liaoning, 121000 China; ****93263 Troops of the Chinese People’s Liberation Army, Jinzhou, Liaoning, 121012 China
Поступила в редакцию 18.03.2019 г. После доработки 10.04.2019 г. Принята к публикации 27.05.2019 г.
DOI: 10.31857/S0132342319060216
Porphyromonas gingivalis является основным патогеном при воспалении периодонта. Цель нашего исследования состояла в анализе влияния белка p62 на аутофагию фибробластов надкостницы зуба человека (ФНЗЧ), вызванную P. gingivalis. Клетки ФНЗЧ инфицировали P. gingivalis; затем уровни аутофагии и экспрессии p62 наблюдали в разные промежутки времени (0, 12, 18 и 24 ч), чтобы обнаружить взаимосвязь между p62 и аутофагией во времени. Аутофагию и апоптоз клеток ФНЗЧ, инфицированных P. gingivalis, детектировали с помощью миРНК, подавляющей экспрессию p62. Флуоресцентная и электронная микроскопия показали наличие аутофагичных вакуолей в клетках ФНЗЧ, инфицированных P. gingivalis. Иммуноблоттинг показал, что экспрессия p62 подавлялась миРНК по сравнению с контролем; соотношение LC3-II/LC3-I значительно уменьшалось, тогда как уровень экспрессии каспазы-3 значительно повышался. Анализ выживаемости клеток CCK-8 показал, что подавление экспрессии p62 снижало выживаемость P. gingivalis в ФНЗЧ. Таким образом, исследования in vitro показали, что присутствие p62 выгодно для поддержания уровня аутофагии в ФНЗЧ, вызванной P. gingivalis, и ингибирования апоптоза. p62 облегчает удаление инвазивных P. gingivalis.
Ключевые слова: Porphyromonas gingivalis, аутофагия, p62, миРНК, LC3, апоптоз _______________ 1 Полный текст статьи печатается в английской версии журнала/
Биоорг. химия 2020, 46 (1): 78